滑膜炎顆粒為夏枯草、土茯苓:功勞葉、薏苡仁、防己、絲瓜絡(luò)、澤蘭、黃芪、丹參、當(dāng)歸等13味藥經(jīng)加工制成的膠囊,具有清熱利濕,活血通絡(luò)的功效。臨床用于急、慢性滑膜炎及膝關(guān)節(jié)術(shù)后的患者。該標(biāo)準(zhǔn)用HPLC法測(cè)定處方中丹參的原兒茶醛含量。本方采用HPLC法對(duì)滑膜炎顆粒(公司自制,規(guī)格0.35 g)中防已的主要成份粉防已堿進(jìn)行測(cè)定,經(jīng)方法考察,結(jié)果令人滿意。
方法與結(jié)果:色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)
色譜柱:Zorbax SB Cl8柱(250 mm×4.6 mm,5 m),流動(dòng)相:甲醇-0.3%二乙胺溶液(85:15);流速:1.0 ml•min~。柱溫:30℃ 。檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm。取對(duì)照品溶液10 l,注入高效液相色譜儀,按上述條件測(cè)定,粉防己堿出峰時(shí)間約為10.0 min,粉防己堿峰理論塔板數(shù)為4 600,與其相臨色譜峰的分離度大于2.0。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取粉防己堿對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成每1 ml含粉防己堿0.12 mg的對(duì)照品溶液(A)。精密量取此對(duì)照品溶液2 ml,置10 ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液B。
供試品溶液的制備取本品約1.4 g,精密稱定,置100 ml具塞三角瓶中,加入流動(dòng)相25 ml,超聲處理(540 W,38.5 kHz)30 min,放冷,稱定重量,用流動(dòng)相補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。按處方比例取不含粉防已的陰性樣品 同法制成陰性對(duì)照溶液。
干擾實(shí)驗(yàn):取不含粉防己陰性對(duì)照溶液及供試品溶液進(jìn)樣,結(jié)果表明,陰性供試品在粉防己堿位置處無(wú)色譜峰。
樣品分別采用流動(dòng)相溶液和2%鹽酸甲醇溶液超聲處理后,取續(xù)濾液1O l,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,從色譜圖中可以看出,以流動(dòng)相處理的樣品色譜峰分離效果明顯優(yōu)于用鹽酸甲醇溶液。
供試品溶液的制備一般常用超聲法或回流法,尤以超聲法最為簡(jiǎn)便。本試驗(yàn)研究考察了樣品加入流動(dòng)相溶液分別超聲處理(540 W,38.5 KHz)15,3O,45 min,取續(xù)濾液1Ol,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,按峰面積用外標(biāo)法計(jì)算含量。測(cè)定結(jié)果表明供試品溶液制備時(shí)超聲處理30 min即可。