驅蟲斑鳩菊對人黑素瘤細胞增殖的研究

來源：新特藥房藥訊作者：鄧瑞春，周勇等瀏覽：發布時間：2007/10/30 14:55:00

早期研究我們發現驅蟲斑鳩菊注射液對蘑菇酪氨酸酶有明顯的促進作用。本研究采用體外培養的人A375黑素細胞作模型進一步研究驅蟲斑鳩菊活性成分黃酮對A375細胞形態、酪氨酸酶活性.黑素含量以及細胞增殖的形晌，旨在研究該藥治療白癜風的作用機理，為其在臨床上廣泛應用提供理論依據。

1材料和方法

1.1材料

驅蟲斑鳩菊注射液：每毫升相當于驅蟲斑鳩菊注射液酮3mg（約相當于原生藥290mg，具有燥濕祛風，舒筋通絡，活血化瘀的作用：DMEM．DL-多巴；酪氨酸酶；噻唑蘭（MTT）；曲拉通X-100（SIG-MA產品）；二甲基亞砜（DMSO ）；人A375黑素瘤細胞（由北京師范大學細胞生物學系提供）。

TGL 16g 臺式商速離心機（上海醫用分析儀器廠），960酶聯免疫側定儀（德國）。

略

2結果

2.1驅蟲斑鴻菊對A375人黑素瘤細胞形態影響

圖1是藥物作用48 h后A375人黑素瘤細胞形態變化。圖中可見，與對照組相比，驅蟲斑鳩菊有效成分黃酮的濃度下細胞形態生長正常，密度增加，樹突增多并延長，但當藥物濃度繼續增高時，細胞內顆粒增多，失去光澤，甚至死亡，顯示出明顯的細胞毒性。

2.2驅蟲斑鴻菊對A375黑素瘤細胞酪氨酸酶活性的影響

表1為驅蟲斑鴻菊體外對人A375黑素瘤細胞酪氨酸酶活性的影響。首先驅蟲斑鴻菊在作用24 h小時后酪氨酸酶活性未見明顯增加，作用48 h后酪氨酸酶活性明顯增加。其次，當驅蟲斑鴻菊濃度在3x1 0-'-3x 10-4叱甸范圍時，隨濃度增加酪氨酸酶活性逐漸增強，濃度再增加，則酪氨酸酶活性反而下降。其可能的原因是商濃度的驅蟲斑鴻菊在體外可能對A375黑素瘤細胞有毒性作用，從而抑制了酪氨酸酶的分泌。

2.3驅蟲斑鴻菊對A375黑素瘤細胞代謝活性的影響

用MIT比色法測定不同濃度驅蟲斑鴻菊體外對培養72 h的A375細胞增殖的影響，從表2可見，驅蟲斑鳩菊的濃度在一定范圍內可使A375黑素瘤細胞代謝加快，表現為隨藥物濃度增加，570 nm光密度吸收值增加。當超過該濃度范圍時對細胞生長產生毒性作用形態上可見大部分細胞死亡，570nm光密度吸收住下降。

2.4驅蟲斑鳩菊對A375黑素瘤細胞黑素含里的影響

驅蟲斑鴻菊對A375黑素瘤細胞作用4d后測定黑素含量，結果見表3。在所側定驅蟲斑鳩菊的濃度范圍內，隨藥物濃度增高，黑素含量不斷增加，與驅蟲斑鴻菊對A375黑素瘤細胞酪氨酸酶活性、細胞增殖活性的影響稍有不同，對黑素含含量的影響未出現高濃度的抑制現象。

3討論

以前的研究發現驅蟲斑鳩菊可在體外激活酪氨酸酶活性，此結果顯示，驅蟲斑鳩菊可能在誘導黑素合成過程中發揮作用。為了進一步研究驅蟲斑鳩菊誘導黑素合成的機制，本研究用人A375黑素瘤細胞作為模型，研究該藥在體外培養的細胞水平對細胞生長、酪氨酸酶活性及合成黑素的影響。結果顯示，藥物作用24 h后，未見驅蟲斑鴻菊對細胞酪氨酸酶活性有影響，在48 h到72 h后測定時，可見酪氨酸醉活性明顯升高，而且隨著劑量增加，酪氨酸酶活性有所增加，但當濃度達到一定時，則出現細胞毒性作用，表現為細胞變形死亡。說明驅蟲斑鳩菊不僅在體外直接激活酪氨酸酶活性，對體外培養的細胞也具有促酪氨酸酶活性合成作用。這一結果與其對細胞生長活性影響十分相似；對分泌黑素功能也隨藥物劑增加，出現明顯促進作用。

參考文獻

I11鄧軍，葉慶偷，刁慶春等．芳香維甲酸乙脂對紫外線誘導的人黑素細胞合成的影響．中華皮膚科雜志，1997，20（6）：389等

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